【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：同型半胱氨酸測定試劑盒（酶法）
【包裝規(guī)格】
試劑1（R1）：1×32ml；試劑2（R2）：1×10.5ml；
試劑1（R1）：2×20ml；試劑2（R2）：1×13ml；
試劑1（R1）：2×32ml；試劑2（R2）：2×10.5ml；
4x60T：（R1：16×3.8ml； R2：8×2.2ml）；
8x60T：（R1：32×3.8ml； R2：16×2.2ml）。
【預(yù)期用途】
供醫(yī)療機構(gòu)用于人血清中同型半胱氨酸濃度的體外檢測，用于輔助診斷。
【檢驗原理】
利用小分子捕獲技術(shù)（SMT）的S-腺苷Hcy（SAH）水解酶的方法，在三-乙-羧乙基膦（TCEP）作用下，氧化型Hcy被轉(zhuǎn)化為游離型Hcy，后者通過與共價底物S-腺苷甲硫氨酸反應(yīng)，生成蛋氨酸和SAH。SAH被SAH水解酶水解成腺苷和Hcy，Hcy經(jīng)循環(huán)反應(yīng)放大信號，同時產(chǎn)生腺苷，腺苷立即水解成氨和次黃嘌呤，氨在谷氨酸脫氫酶的作用下，使NADH轉(zhuǎn)化為NAD+，樣本中的Hcy含量與NADH轉(zhuǎn)化速率呈正比。
【主要組成成分】
試劑1：
S-腺苷甲硫氨酸（SAM） 0.1mM
NADH > 0.2 mM
TCEP（磷酸三氯乙酯） > 0.5 mM
2-酮戊二酸 5.0 mM
試劑2：
谷氨酸脫氫酶 10KU/L
SAH水解酶 3.0 KU/L
腺苷脫氨酶 5.0 KU/L
Hcy 甲基轉(zhuǎn)移酶 5.0 KU/L
不同批次試劑不得混用。
【儲存條件及有效期】
試劑盒自生產(chǎn)之日起避光、密閉儲存于2-8oC，有效期為12個月。保存在生化儀上的開瓶試劑可以穩(wěn)定保存30天。
生產(chǎn)日期及有效期見標(biāo)簽。
【適用儀器】
本產(chǎn)品主要適用于下列開放式全自動生化分析儀。建議用戶在下列儀器上使用本產(chǎn)品前，根據(jù)實驗室情況進行驗證。
（1）HITACHI 7060、7080、7180、7600型號的開放式全自動生化分析儀
（2）OLYMPUS AU 400、AU640、AU2700、AU5400型號的開放式全自動生化分析儀
（3）Abbott C8000型號的開放式全自動生化分析儀
（4）Roche Modular P800型號的開放式全自動生化分析儀
（5）BECKMAN DXC800型號的開放式全自動生化分析儀
（6）邁瑞400，800型號的開放式全自動生化分析儀
（7）西門子RXL-MAX型號的全自動生化分析儀
（8）東芝120型號的開放式全自動生化分析儀
（9）東軟400型號的開放式全自動生化分析儀
（10）Bayer ADVIA 1650/2400型號的開放式全自動生化分析儀
【樣本要求】
新鮮的血清，樣本收集之后要立即離心分離血清；假如不能立即離心，收集好的樣本應(yīng)該放在冰箱中保存，并且在一個小時內(nèi)離心。溶血、混濁和脂血的樣本不建議使用。經(jīng)過分離的血清樣本在室溫可以保存4天，在0－8℃能保存幾周，在－20℃能保存幾個月。
【檢驗方法】
1.試驗條件：主波長340nm，比色杯光徑1.0cm，溫度37℃。
2.試驗方法：
| 空白 | 校準(zhǔn)品 | 樣本 | |
| 試劑1 | 240 | 240 | 240 |
| 空白（μl） | 13 | ||
| 校準(zhǔn)品（μl） | |||
| 樣本（μl） | |||
| 37℃溫浴5min | |||
| R2（μl） | 65 | 65 | 65 |
| 37℃溫浴2.5 min，讀取吸光度A1 | |||
| 37℃溫浴2.5 min，讀取吸光度A2 | |||
△A=[(A2-A1)校準(zhǔn)品管或樣品管]-[(A2-A1)空白管]
以日立7060全自動生化儀為例，參數(shù)設(shè)置如下：
| 溫度 | 37℃ | 反應(yīng)方法 | 兩點速率法 |
| 副波長/主波長 |
700nm/340nm |
R1/s/R2 |
240μl/13μl /65μl |
| 擬合方式 | Spline | 反應(yīng)方向 | 下降 |
|
A1測光點 |
24 | A2測光點 | 31 |
3. 校準(zhǔn)及質(zhì)量控制程序：
在對樣本進行檢測時須使用商品化的、具有溯源性的校準(zhǔn)品進行定標(biāo)后，再對商品化的、具有溯源性的質(zhì)控品進行檢測，其檢測結(jié)果必須在允許范圍內(nèi)，才能對樣本進行檢測。
4. 試驗結(jié)果的計算方法：
以同型半胱氨酸校準(zhǔn)品的標(biāo)示濃度為橫坐標(biāo)（X），以同型半胱氨酸校準(zhǔn)品的實際測定吸光度值（ΔA）為縱坐標(biāo)（y），進行非線性擬合，如spline、logit等，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，將待測樣本的測定吸光度值（ΔA）代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可得出相應(yīng)待測樣本同型半胱氨酸（Hcy）的濃度（μmol/L）。
【參考區(qū)間】
參考范圍是≤15μmol/L，建議各實驗室確立所服務(wù)人群的參考范圍。
【檢驗結(jié)果的解釋】
樣本中血紅蛋白≤1200mg/dL、膽紅素≤20mg/dL、甘油三脂≤2500mg/dL、維生素C≤10mmol/L、胱硫醚≤20μmol/L時對測定無干擾。
【檢驗方法的局限性】
1. 本試劑的線性范圍0～50μmol/L，當(dāng)樣本中同型半胱氨酸濃度高于50μmol/L時，應(yīng)該用水稀釋后再測定，結(jié)果乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
2. 本試劑保存于2~8oC，不可凍存。
3. 試劑應(yīng)該是清澈的，若變混濁或初始吸光度小于0.800A（340nm，光徑1.0cm）應(yīng)該丟棄。
4. S-腺苷同型半胱氨酸會引起明顯的正干擾，但正常人體血漿中含SAH的量極低，不會對測試結(jié)果造成干擾。
5. 病人可能因為攝入某些藥物引起同型半胱氨酸升高：如甲氨蝶呤、卡馬西平、苯妥英、含氮的氧化物，抗驚厥劑等。
6. 不能檢測含有3-偶氮腺苷的樣本。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
1外觀：在自然光條件下進行目視檢測，產(chǎn)品主要原材料的外觀要求如下：
試劑1：無色澄清液體；
試劑2：無色至淡黃色澄清液體；
2 凈含量：≥標(biāo)示量。
3試劑空白吸光度（340nm、37℃&1.0cm光徑）：≥0.800A。
4分析靈敏度：試劑測試10μmol/L的同型半胱氨酸樣本時，吸光度差值ΔA≥0.01A
5線性：線性在0～50μmol/L范圍內(nèi)：
a)線性相關(guān)系數(shù)（r）≥0.995；
b) 線性偏差不超過±10%，絕對偏差應(yīng)不超過±1.0μmol/L（零點計算用）。
6精密度：
6.1重復(fù)性CV≤5.0%（樣本濃度為10.0±2.0μmol/L），CV≤3.0%（樣本濃度為20.0±4.0μmol/L）；
6.2批間相對極差≤10%（樣本濃度為10.0±2.0μmol/L）。
7準(zhǔn)確度：測試可用于評價常規(guī)方法的參考物質(zhì)，結(jié)果與標(biāo)示值的相對偏差應(yīng)不超過±15%。
8穩(wěn)定性：試劑盒自生產(chǎn)之日起避光，密閉儲存于2~8℃，可穩(wěn)定12個月。
【注意事項】
1. 本試劑盒僅供體外診斷使用。
2. 不同批號的試劑不得混用。
3. 試劑中含有防腐劑疊氮化鈉，請勿直接接觸皮膚、眼睛。一旦接觸，即用大量清水沖洗。請勿吞服。
4. 試劑盒的測定結(jié)果僅作為各種疾病的臨床輔助診斷依據(jù)。
5. 試劑和樣本的用量可根據(jù)儀器的不同比例改變。
6. 校準(zhǔn)品雖然對其潛在的危險已經(jīng)處理過，但仍需按照人源樣本對待。
7. 校準(zhǔn)品中含有甘油，全自動分析儀要按照日常清洗程序進行清洗，以免試劑覆蓋在試劑針上。
【參考文獻】
1《體外診斷試劑臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則》（試行）
2《臨床實驗室參考范圍的定義和確定》
3 2006年東南大學(xué)出版社出版的《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第三版
4《臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）通用技術(shù)要求》
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